En el teatro fue un gran intérprete del repertorio de Eduardo de Filippo, dirigiendo además sus célebres comedias.

Hermano menor del también actor Aldo, se graduó en la Accademia nazionale d'arte drammatica de Roma, comenzando a trabajar con su hermano en teatro en 1947. Dos años más tarde, los hermanos Giuffré debutaron con Eduardo De Filippo, interpretando la mayoría de las comedias napolitanas de este gran autor, gracias a las cuales el joven Carlo lució sus dotes de actor de vocación cómica y grotesca.

En 1963, entró en la Compagnia dei Giovani trabajando junto a Giorgio De Lullo, Rossella Falk, Romolo Valli y Elsa Albani, con los cuales actuó durante ocho temporadas seguidas en obras como Seis personajes en busca de autor de Pirandello, Las tres hermanas de Chéjov o Egmont de Goethe.

Posteriormente, junto a su hermano puso en escena, también en el papel de director, comedias del repertorio de Eduardo De Filippo, como Le voci di dentro, Napoli milionaria!, Non ti pago y Natale in casa Cupiello.

Numerosas fueron también sus actuaciones en el cine y en series de televisión de RAI, como Tom Jones (1960) o I Giacobini (1962).

Fue uno de los actores más característicos de la última fase de la Commedia all'italiana, interpretando personajes como Vincenzo Macaluso en La ragazza con la pistola (1968), Silver Boy en Basta guardarla (1971), el esposo engañado en La signora è stata violentata! (1973) o el amante incansable en La signora gioca bene a scopa? (1974).

En 1971 presentó en televisión la 21ª edición del Festival de la Canción Italiana de San Remo.

En el 2007, con ocasión de la entrega del premio a la trayectoria por parte del "Premio ETI - Gli olimpici del teatro", recibió el reconocimiento de Gran Oficial de la República Italiana por el Presidente Giorgio Napolitano y puso en escena otro clásico del teatro de Eduardo De Filippo, ¡Chao, don Antonio Barracano!. Posteriormente, actuó en teatro en I casi sono due de Armando Curcio y Questi fantasmi! de Eduardo De Filippo.

Murió el 1 de noviembre de 2018, tras una larga enfermedad, a la edad de 89 años